附件：

青海省2007年结核菌参比实验室工作计划

为保证全省结核病防治工作2007年实施计划的顺利实施，确保现代结核病控制策略（DOTS）执行质量，根据2006年各级结核菌实验室质控工作进展，结合实际制定全省2007年结核菌参比实验室工作计划。

一、目的

采取有效措施，通过痰涂片显微镜检查积极发现传染性肺结核病人，考核结核病人治疗效果，确保《规划》各项任务指标的如期完成。

（一）  通过实施结核病控制项目，加快结核病控制工作进程；

（二）  通过实施痰涂片镜检质量控制，提高涂阳肺结核病人发现率和治愈率；通过

加强各级实验室人力资源及能力建设，完善实验室网络建设。

二、目标

（一）可疑肺结核病人就诊率达到300／100,000以上。

（二）可疑肺结核病人痰检率≥95%；随访肺结核病人2月末痰检率≥95%；5月末痰检率≥90%；治疗结束痰检率≥90%。

（三）保持阳性片符合率≥98%，阴性片符合率≥96%。

（四）在地区级实验室用双盲法对县级的痰涂片进行复检，对结果不符的痰涂片送至省级实验室做终检，并将检验结果及时反馈县级实验室。

（五）以县为单位的实验室EQA覆盖率在95％以上。

（六）加强结核菌实验室生物安全管理，改善各级结核菌实验室工作条件，逐步达到国家所要求的生物安全标准。

（七）在海西州格尔木市完成全国结核病耐药性基线调查点的调查工作。

三、主要政策及内容

（一）主要技术政策

1.　痰涂片检查：是传染性结核病的诊断指标；是评价传染性结核病化疗效果的依据；为结核病流行病学指标服务。

（1）确定诊断：凡因结核病症状就诊及转诊的可疑肺结核患者，均应进行直接痰涂片检查。一般包括持续咳嗽、咳嗽超过2周；咯血或伴有血痰；发热或胸痛超过2周；胸部X线异常等的患者。

（2）疗效评价：凡已确诊、登记治疗的肺结核患者，在化疗期间按照规定定期查痰。

①　初治涂阳患者 (含重症涂阴及涂阴病人)在疗程满2、5、6个月时，复治涂阳患者在疗程满2、5、8个月时，按期送检两份痰（当日即时痰、当日或次日晨痰）。　

②　初、复治涂阳患者在疗程满2个月时，痰菌仍为阳性者，应在治疗满3个月时增加查痰一次。　

③  确诊、登记的涂阴肺结核患者，即使患者因故未接受治疗，也应在登记后满2个月和6个月时进行痰菌检查。　

2.　痰标本的采集

（1）容器：采用省级统一提供的国际通用螺旋盖痰盒，痰盒侧面磨砂部应标明病人姓名、日期、编号（初诊病人门诊序号或随访病人登记号）和痰盒序号1、2、3（1=当日即时痰，2=夜间痰，3=次日晨痰）。

（2）痰标本性质：干酪痰、血痰、粘液痰为合格标本；唾液或口水为不合格标本，除照常进行涂片检查外，应要求患者重新送检。

（3）对当日不能进行涂片检查的痰标本，须置于4℃冰箱保存，注意防止痰液干涸或污染。                       

3.　痰涂片抗酸染色检查方法

（1）萋-尼氏(Ziehl-neelsen)染色液制备

①　有染色液制备配方、流程和配制记录。

②　染色液试剂瓶须标明染色液名称、浓度和制备时间。

③　染色液置于棕色瓶内存放，避光保存。

（2）载玻片

①　新载玻片应经95%乙醇脱脂，检查无划痕后方可使用。

②　一张载玻片只能涂抹1份痰标本。
③　载玻片只允许一次性使用，不得清洗后重复使用。

④　载玻片正面左侧磨砂处用铅笔或记号笔标记实验序号。

⑤　载玻片正面右侧2/3中央处均匀涂抹成面积为1.0×2.0㎝卵圆形痰膜。

（3）染色
①　染色程序按国家统一下发的萋-尼氏(Ziehl-neelsen)染色操作流程图进行染

色。

②　肉眼观察染色后的痰膜应呈均匀淡蓝色，无红色斑块。

③　染色后的涂片放置在报纸上，如果文字透过痰膜不能被看清，表明该涂片涂

抹的太厚。

④　染色后的痰膜脱落部分应小于整个涂抹面积的10%。　

（4）镜检要求

①　镜油使用省级统一提供的沉浸油。

②　为防止抗酸杆菌的交叉污染，严禁油镜头直接接触涂片上的痰膜。
③　每张涂片应连续观察300个视野。
④　一名镜检人员连续阅读10-12张痰涂片后，应休息20分钟左右。

⑤　采用自查和互查方式进行室内质控，至少抽查复检当日10%涂片，并填写室内

质控登记表。

室内质量控制每日涂片抽查复检登记表

单位名称：                                                            年    月

（5）登记报告

①　登记前应反复核对检验单、标本盒、涂片上的标注。
②　检查后的每一张涂片结果，应按规定准确记录在“结核病细菌学实验室登记

本”上。

③　镜检结果报告应于当日内发出，以便尽早为临床提供诊断依据。

④　乡镇查痰点痰涂片检查结果与报告：及时在登记本上登记痰检结果。发现的阳性痰涂片，农业区痰检点应在12小时内报县级结防科，县级结防科应在2天内进行复查，阴性涂片要求在一周内报到县级结防科复查。边远牧区痰检点发现的阳性涂片，应在2-3天内报县级结防科，县级结防科应在4天内进行复查，阴性涂片要求在一周内报到县级结防科复查。痰涂片检查的最终结果由县级确认。

（6）涂片的保存

①　镜检后的涂片应及时用浸满二甲苯（分析纯）的擦镜纸揭取数次，彻底去除涂片上的镜油。
　　 ②　涂片干燥后，必须再次核对实验室登记本与每张涂片实验序号。
　　 ③　涂片上禁止标记镜检的阴、阳性结果或暗记。
　　 ④　全部涂片按实验室登记本序号排列，存放于玻片盒内。
　　 ⑤　按规定数量保存的用于室间质量控制的痰片，未经上级质控单位准许不能自行销毁。
　　 ⑥　装满涂片的玻片盒，需用标签注明涂片实验序号区间和日期区间，以便日后盲法复检或现场评价时抽样。

4.  痰涂片镜检质量保证

（1）室内质控

对实验室内部的操作规程、设备和耗材、痰标本收集、染色剂制备、涂片制备和染色、显微镜维护、显微镜镜检、结果登记和报告、以及痰片保存等整个过程的内部检查和检验人员当日自查、互查。

（2）室间评估

①　现场评价

－ 省级参比室每年对地区级实验室至少进行1次现场评价，同时每地（市）抽查1-2个县级实验室；必要时，对批量检测或盲法复检存在问题的地区和县级实验室增加现场评价频率。

－ 地区级实验室每年对所辖县（区）实验室至少进行2次现场评价。

－ 现场督导员的主要责任是通过现场评价发现问题，提出正确的建议解决问题，提高痰涂片镜检质量。

②　盲法复检

盲法复检需要一个有效的结核病实验室质控网络支持，网络中的各个实验室承担的工作如下：

－ 省参比室为第二复检者，负责实施地区和部分县级实验室涂片现场抽样，安排第一复检者之间的盲法复检；对涂片初检结果和盲法复检结果的分歧进行再次复检。
     － 地区级实验室承担第一复检者和第二复检者双重责任。作为第一复检者需完成省参比室下发涂片样本的盲法复检；作为第二复检者要负责实施县级实验室涂片样本现场抽样，安排第一复检者之间的盲法复检，对涂片初检结果和盲检结果的分歧进行复检，并将质控结果及时反馈给被督导实验室和第一复检者。

－ 县级实验室为第一复检者，负责完成地区级实验室下发涂片样本的盲法复检，复检完成后，结果和涂片样本需及时上交。

－ 省参比室对地区级实验室每半年应进行1次批量测试；地区级实验室对县

级实验室的盲法复检，每季度进行1次。

③　各级痰检实验室职能

省级结核菌参比实验室职能：

－ 根据《规划》、国家参比室和全省结核病防治工作年度实施计划，制定本省年度结核菌参比实验室工作计划。

－ 收集、整理、统计、分析省内室间质量保证信息、数据，按要求定期上报国家参比实验室。

－ 负责省内质量保证的技术支持与培训；组织、协调、评估本省各地区和县级实

验室室间质量保证工作。

－ 负责地区级结核菌实验室的现场评价、批量测试、随机抽样和委托第一复检者盲法复检。

－ 承担地区级结核菌实验室盲法复检的第二复检者复检工作，即地区与地区之间复检。

－ 负责指导、监督地（市）级实验室实施县级实验室室间质量评估工作。

地区级结核菌参比实验室职能：

－ 根据省级参比室的要求，制定本地区年度痰涂片室间质量评估实施计划。

－ 收集、整理、统计、分析本地区内室间质量评估信息数据，以及乡镇痰检点痰检工作季报表（附件2）按时上报省级参比实验室。

－ 负责本地区内结核菌实验室质量保证的技术支持与培训；组织、协调、评估各

县级实验室的室间质量评估工作。

－ 做好地区级结核菌参比实验室痰涂片镜检和室内质控工作，接受省级参比室定期室间质量评估督导。

－ 承担同级间实验室（地区）第一复检者盲法复检工作，即地区与地区之间复检。

－ 负责实施县级结核菌实验室的现场评价、批量检测、盲法复检和第二复检者的复检工作。

县级结核菌实验室职能：
     － 做好县级实验室痰涂片镜检和室内质控工作，接受上级结核菌实验室定期室间质量评估督导。

－ 承担同级间实验室（县级）第一复检者盲法复检工作，即县与县之间复检。

－ 按痰涂片镜检质量保证的要求，做好痰涂片的保存和资料的统计工作。

－ 负责对乡镇痰检点人员的培训、指导、复核和数据收集，以及乡镇痰检点痰检工作月报表（附件3）按时上报地区级。

四、主要活动

（一）培训

1. 培训教材：卫生部疾病控制司编印的《中国结核病防治规划实施工作指南》、中国疾病预防控制中心编印的《痰涂片镜检质量控制保证手册》、《结核病防治》以及相关的工作计划和方案等。

2. 培训对象: 各级结核菌痰检实验室专业技术人员。

3. 培训的实施: 州（地、市）、县级专业技术人员由省级和地区级负责培训；乡（镇）卫生院查痰点检验人员由县（区）级负责培训。

4. 开展县与县之间结核菌痰检实验室专业技术人员交流学习。

5. 开展全省范围内的批量测试工作。

（二）督导

1. 省级参比室人员同省级督导员对各地区每年督导1-2次，对地区级和县级实验室的工作进行评价，并进行有效的现场培训。

2. 地区级参比室人员每年对各县级实验室督导4次，对县级实验室的工作进行评价，并进行有效的现场培训。

3. 县级实验室对乡镇卫生院查痰点要进行定期指导和痰检结果的确认，并将信息反馈给被督导的乡镇卫生院和地区级参比室。

（三）质量控制

1. 省级结核菌参比实验室保证全省各级结核菌实验室痰检所需试剂原料及其它实验室耗材不间断供应。

2.保证各实验室提供准确的痰检结果。

3. 阳性片准确率≥98%，阴性片准确率≥96%。

4. 地区级每3个月对县级实验室痰检质量进行现场督导评价，并核对实验室登记本和结核病人登记本记录。

5. 及时将抽检结果反馈给被抽检实验室。

6. 按照《痰涂片镜检质量保证手册》开展室内质控，包括检查实验室的染色技术、读片、报告及实验室布局、清洁程度以及设备状况等；开展室间质量评估。

7. 由州（地、市）级痰检参比室负责配制萋-尼氏(Ziehl-neelsen)染色液（包括乡镇痰检点），并统一分发至县级实验室，由县级分发至乡镇痰检点。

8. 通过解决质控评估中发现的问题提高实验室技术人员工作技能。

9. 在全省范围内，继续开展乡镇卫生院查痰点工作，查痰点的室内质控及试剂质控由县级进行，地区级复检。

10. 结核病耐药性基线调查工作质量控制按照青卫疾控［2006］80号文件执行（青海省卫生厅关于开展结核病耐药性基线调查工作的通知）。

    11. 按时向省结核病参比实验室上报痰涂片盲法复检结果登记表（见附件1）、乡镇

痰检点痰检工作季报表（附件2）。乡镇痰检点痰检工作月报表（附件3）由县级上报地（市）级汇总。上报时间要求同中国结核病控制项目月报表和季报表时间。

五、经费预算

根据青海省2007年度结核菌参比实验室工作计划，制定经费预算277,253元。（本预算仅为开展日常工作预算，不包括设备采购。）

(一) 2007年青海省痰检用品和染色试剂需求经费预算

(二) 2007年青海省55个结核菌实验室其它耗材经费预算

(三) 2007年青海省结核菌实验室的改善所需经费预算

(四) 2007年青海省实验室印刷品经费预算

(五) 青海省2007年实验室培训经费预算

注：授课费用   15元/小时×6小时/天

(六) 青海省2007年实验室督导经费预算

1. 省级对地区级的督导：每年2次，8个地区，共16次；每次督导8个地区需要76天，每年2次，共152天；差旅费用共计18,240元(不包括车辆燃料费19,200元)。

2. 地区级对县（区）级的督导：每年4次，46个县（区），共184次；每次督导46个县（区）需要138天，共552天；差旅费用共计55,200元(不包括车辆燃料费64,400元)。

附件1：

表6  痰涂片盲法复检结果登记表

单位名称：

评价及建议：                                                              　　　　签名：                         

日期：